植物組織培養實(shí)驗室主要儀器設備
1. 超凈工作臺
目前絕大部分細胞實(shí)驗室使用超凈工作臺實(shí)現無(wú)菌操作,具有操作簡(jiǎn)單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。安徽人和凈化為您介紹兩種主要超凈工作臺-側流式(垂直式)和外流式(水平層流式)。工作原理一般是將室內空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾,由離心風(fēng)機壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區,從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。
(1) 側流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側通過(guò)工作臺面流向對側,也有從上向下或從下向上流向對側,形成氣流屏障保持工作區無(wú)菌,工作臺結構為封閉式;
(2) 外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動(dòng),因而外方氣流不致混入操作,工作臺結構為開(kāi)放式,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗操作對操作者不利。 超凈工作臺應需要定期請有關(guān)部門(mén)檢查潔凈度,符合要求的超凈工作臺其潔凈度應達到100級,用塵埃粒子計數儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數量不應超過(guò)3.5個(gè)/L;空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s;細菌菌落數平均<1個(gè),根據無(wú)菌狀況必要時(shí)需要置換過(guò)濾器。
2. 顯微鏡
倒置式顯微鏡是細胞培養實(shí)驗室日常工作常規必備設備,主要用于日常了解細胞的生長(cháng)情況并觀(guān)察有無(wú)污染發(fā)生。如資金允許,建議選用配置有照相系統的高品質(zhì)相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統或縮時(shí)電影拍攝裝置等,可隨時(shí)拍攝并記錄細胞生長(cháng)情況。
3. 培養箱
體外培養的細胞和體內細胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,一般最適生長(cháng)溫度為37℃,溫差變化不應超過(guò)±0.5℃。溫度升高2℃時(shí),變不利于細胞生存,溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此,可精確控溫的恒溫培養箱、CO2培養箱是最佳選擇。
(1) 恒溫培養箱:應選隔水式或晶體管式自控溫培養箱,此類(lèi)培養箱靈敏度高,溫度控制較穩定。一般的恒溫培養箱價(jià)格較便宜,其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養。
(2) CO2培養箱:目前多數的細胞培養室已廣泛使用。CO2培養箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細胞培養時(shí)所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%),易于穩定培養液pH,適用于開(kāi)放或半開(kāi)放培養。使用培養瓶時(shí),為使培養瓶?jì)扰c外界保持通氣狀態(tài),可將瓶蓋略微旋松,為避免細胞被污染,使用這種培養方式時(shí),培養箱內空氣必須保持清潔,需定期用紫外線(xiàn)照射或酒精消毒,同時(shí)培養箱內應放置盛有無(wú)菌蒸餾水的水槽,防止培養液蒸發(fā),保持箱內相對濕度在100%。 #p#分頁(yè)標題#e#
(3) 細胞培養耗材:培養細胞的器皿可用培養皿、培養板或培養瓶。
4. 烘箱(干燥箱)
用于細胞培養的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí),烘箱內溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好,缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始,至100℃時(shí),停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長(cháng)。消毒后不能立即打開(kāi)箱門(mén),以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開(kāi)門(mén)。
5. 水純化裝置
細胞培養對水的質(zhì)量要求較高,細胞培養、細胞培養相關(guān)液體的配制用水以及清洗細胞培養器皿用水都必須事先經(jīng)過(guò)嚴格的純化處理。目前有多種純化方法相結合,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,可掛壁式、臺式、可配儲水箱、也可直接用分液槍、還可根據各類(lèi)實(shí)驗用水要求選擇配置殺菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉熱源、內毒素的超濾型純水裝置。